及时解决大小鼠脊髓模具故障是保障其正常使用的核心
大小鼠脊髓模具是神经科学研究中用于脊髓组织标准化取材、固定与切片的关键辅助工具。其精密槽道设计可有效保持脊髓解剖完整性,提升实验重复性。在实际操作中,可能会因组织处理不当、模具匹配错误或操作粗放导致组织变形、断裂、脱模困难等问题,严重影响后续染色、成像及数据分析。科学识别大小鼠脊髓模具出现故障的根源并采取针对性措施,是保障其正常使用的核心。

一、脊髓在模具中移位或漂浮
原因:包埋剂注入过快产生气泡,或OCT未充分浸润组织。
解决方法:
缓慢倾斜注入OCT,让液体自然填充槽道,避免冲击脊髓;
用细针轻压脊髓使其贴底,再补加包埋剂;
对固定后较硬的脊髓,可先在模具中滴少量OCT预粘附,再整体包埋。
二、脱模时组织断裂或粘连模具
多因冷冻不充分或模具未预冷:
确保模具与OCT块在–80℃冷冻≥30分钟,形成均匀冰晶结构;
脱模前将模具短暂置于室温(1–2秒)或用手心微热外壁,使OCT轻微融化即可轻松脱出;
若反复粘连,可在模具内壁薄涂一层防粘剂(如稀释的甘油),但需避免污染组织。
三、切片时脊髓横断面不完整或碎裂
典型为组织未固定或冷冻速率不当:
灌注后脊髓需在4%多聚甲醛中后固定12–24小时(4℃),增强韧性;
冰冻切片前避免反复冻融,防止冰晶破坏细胞结构;
切片刀保持锋利,切片速度调慢,温度控制在–18℃至–22℃。
四、模具槽道残留OCT或石蜡难以清除
OCT残留:用温水(≤40℃)浸泡10分钟软化后冲洗,勿用热水以防模具变形;
石蜡残留:浸泡于二甲苯或专用脱蜡液中溶解,再用乙醇梯度清洗;
清洁后晾干,避免水渍腐蚀金属模具。
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