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大小鼠脊髓模具的规范操作方法分享

点击次数:14 更新时间:2026-01-01

   大小鼠脊髓模具是一种专用于神经科学研究中脊髓组织精准定位、固定与切片制备的实验辅助工具,广泛应用于脊髓损伤、神经退行性疾病及药物干预等动物模型研究。其通过标准化槽道设计,确保脊髓在灌注、取材、冰冻或石蜡包埋过程中保持解剖完整性与空间一致性,从而提升组织切片质量与实验可重复性。掌握大小鼠脊髓模具科学、规范的操作方法,是实现准确的关键。

 


  一、使用前准备
  清洁模具:使用前以75%乙醇擦拭或超声清洗,去除残留组织或固定液,避免交叉污染;
  预冷处理:冰冻切片用模具需提前置于–20℃冰箱或干冰上预冷,防止组织融化;
  匹配规格:根据实验动物种类选择对应模具——小鼠模具槽道长约3–4cm,大鼠约4–5cm,直径适配胸腰段脊髓(小鼠Φ1.5–2mm,大鼠Φ2.5–3mm)。
  二、脊髓取材与置入规范
  动物经心脏灌注生理盐水及4%多聚甲醛后,迅速取出整段脊柱,置于冰冷PBS中;
  在解剖显微镜下小心剥离椎骨,完整取出脊髓,避免牵拉或挤压;
  将新鲜或固定后的脊髓轻柔置入模具中央槽道,确保头尾方向一致,无扭曲或折叠。
  三、包埋与固定操作
  冰冻切片:注入OCT包埋剂至没过脊髓,倾斜缓慢排除气泡,–80℃速冻;
  石蜡切片:将模具连同脊髓转入脱水梯度,再浸蜡包埋,确保组织与蜡充分融合;
  包埋过程中可用细针轻压脊髓,使其贴合槽底,防止漂浮偏移。
  四、脱模与切片要点
  冰冻块从模具中轻敲脱出,若粘连可短暂回温1–2秒;
  切片时使脊髓横断面垂直于刀片,确保获得标准横切面;
  对纵切实验,可选用带纵向槽道的专用模具,或旋转90°放置脊髓。
  五、使用后维护
  切勿用金属器械刮擦模具内壁,以免划伤影响后续组织贴合;
  OCT残留可用温水浸泡软化后冲洗,石蜡残留用二甲苯溶解;
  干燥后存放于洁净盒中,避免灰尘沉积。

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